产品货号：
JN0067
中文名称：
T4多聚核苷酸激酶(T4 PNK)
英文名称：
T4 Polynueleotide Kinase
产品规格：
200U|1000U
发货周期：
1～3天
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T4多聚核苷酸激酶（T4 PNK），是一种多聚核苷酸5'羟基激酶，能够催化ATP的γ-位磷酸向双链/单链DNA或RNA以及带有3'磷酸基团的单核苷酸5'-羟基进行转移和交换：5'-OH + NTP5'↔P + NDP；该酶还具有3′磷酸酶活性，将3'-磷酸基团从寡核苷酸的3'磷酸末端、脱氧3'-单磷酸核苷和脱氧3'-二磷酸核苷上水解掉。
| 组分 | 200U | 1000U |
| T4 PNK(10U/μL) | 20μL | 20μL×5 |
| 10×T4 PNK反应缓冲液 | 1mL | 1mL×5 |
| 10mM ATP | 50μL | 50μL×5 |
保存：-20℃
- 引物或PCR产物的5'末端磷酸化以便进行连接反应；
- 合成DNA接头(Linker)的5'末端磷酸化以便进行连接反应；
- DNA及RNA 5'末端的标记，用作寡核苷酸探针。
以微球菌核酸酶处理的小牛胸腺DNA为底物，在37℃，pH7.6的条件下，30分钟内使1nmol的[γ-32P]ATP掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性单位。
多次柱纯化，SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带，PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留，无核酸内、外切酶、磷酸酶以及RNA酶活性污染。
- 1×T4 PNK反应缓冲液中不含ATP，需在反应体系中加入终浓度为1mM的ATP，也可以使用T4 DNA连接酶的反应液代替。
- 铵离子强烈抑制T4 PNK活性，故DNA应溶于不含铵盐的溶液中。
- DTT氧化会造成酶活性下降，当缓冲液不新鲜时，需补加DTT。
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